Product name :Cell Counting Kit (CCK)

Product Code:K009

CCK is a one-bottle solution;no premixing of components is required.CCK ,being nonradioactive, allows sensitive 

colorimetric assays for the determination of the number of viable cells in cell proliferation and cytotoxicity assays.

WST-8 is reduced by dehydrogenases in cells to give an orange colored product(formazan),which  is  soluble  in 

the tissue culture medium(figure2).The amount  of the  formazan  dye generated  by dehyhrogenases  in  cells is 
directly proportional to the number of living cells.

                                 Figure3. Different of CCK,XTT,MTS and MTT

Figure3 shows that the cell proliferation assay using CCK correlates well with the [3H]-thymidine incorporation assay.

Thus,the CCK assay can also be substituted for the [3H]-thymidine incorporationassay.As is higher than that using 

othertetrazolium salts such as MTT,XTT,MTS or WST-1.

50tests :                       0.5ml×1tube

100tests :                     1 ml ×1tube

500tests :                     5 ml ×1bottle

1000tests :                   10 ml×1bottle

3000tests :                   30 ml×1bottle

CCK is stable over one year at 4℃ with protection from light .Store it at -20℃ for longer storage . Repeated thawing 

and freezing causes an in crease in the background, which  interferes  with  the assay.Please  store  the kit at 4 ℃ for 

frequent use.

- plate reader(450nm filter)

- 96-well plate

- CO2 incubator

- 10ul and 100-200ul multi-channel pipettes

Number of Cells Determination

1.Inoculate cell suspension (100ul/well）in a 96-well plate.Pre-incubate the plate in a humidified incubator(e.g.,at 37℃，

5% CO2).

2.Add 10ul of the CCK solution to each well of the plate.

Be careful not to introduce bubbles to the wells ,since they interfere with the O.D. Reading.

4. Incubate the plate for 1 - 4 hours in the incubator.

5. Measure the absorbance at 450 nm using a microplate reader.

To measure the absorbance later, add 10μl of 1% w/v SDS or 0.1 M HCl to each well, cover the plate and store  it with

protection from light at room temperature. No absorbance change  should be observed for 24 hours .  

Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay

1.Dispense 100 μl of cell suspension (5000 cells/well) in a 96-well plate. Pre-incubate the plate for 24 hours in a  humid

-ified incubator (e.g., at 37°C,5% CO2).

2.Add 10 μl of various concentrations of substances to be tested to the plate.

3.Incubate the plate for an appropriate length of time (e.g., 6, 12, 24 or 48 hours) in the incubator.

4.Add 10 μl of CCK solution to each well of the plate.

Be careful not to introduce bubbles to the wells, since they interfere with the O.D. reading.

5.Incubate the plate for 1 - 4 hours in the incubator.

6. Measure the absorbance at 450 nm using a microplate reader.

To measure the absorbance later, add 10 μl of 1% w/v SDS or 0.1 M HCl to each well, cover the plate and store it with  

protection from light at room temperature. No absorbance change should be observed for 24 hours.

Cell Counting  Kit(CCK) allows  very  convenient  assays  by  utilizing ZETA LIFE‘s highly   water-soluble tetrazolium salt.